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目的 建立基于抗体-适配子双夹心的高尔基体蛋白73 (GP73) ELISA检测方法,并用于血清GP73的检测.方法 以抗体-适配子双夹心的模式,通过正交试验和方阵滴定试验确定GP73特异性抗体和适配子最佳工作水平、反应的温度和时间等.以GP73重组蛋白建立标准曲线并评价该方法灵敏度、精确度、线性及准确度等.利用该方法对59例对照组患者及77例肝癌患者血清进行GP73水平检测,并同步进行电化学发光定量测定甲胎蛋白(AFP)水平.结果 该方法标准曲线的批内变异系数(CV)为3.87%,批间CV平均为4.44%;平均回收率为95.8%,灵敏度达12.0 ng/mL.肝癌患者血清GP73水平均明显高于对照组、肝炎组和肝硬化组(P<0.05).GP73对原发性肝癌诊断灵敏度为85.7%,而AFP为62.3%;而早期肝癌中GP73和AFP灵敏度分别为76.7%、36.7%.结论 成功建立基于抗体-适配子夹心的GP73 ELISA检测方法,该方法可用于临床检测GP73水平.

作者:洪建明;冼中任;曾林玉;徐霞

来源:国际检验医学杂志 2016 年 37卷 12期

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作者:
洪建明;冼中任;曾林玉;徐霞
来源:
国际检验医学杂志 2016 年 37卷 12期
标签:
高尔基体蛋白73 适配子 酶联免疫吸附试验 肝癌 GP73 aptamer enzyme linked immunosorbent assay liver cancer
目的 建立基于抗体-适配子双夹心的高尔基体蛋白73 (GP73) ELISA检测方法,并用于血清GP73的检测.方法 以抗体-适配子双夹心的模式,通过正交试验和方阵滴定试验确定GP73特异性抗体和适配子最佳工作水平、反应的温度和时间等.以GP73重组蛋白建立标准曲线并评价该方法灵敏度、精确度、线性及准确度等.利用该方法对59例对照组患者及77例肝癌患者血清进行GP73水平检测,并同步进行电化学发光定量测定甲胎蛋白(AFP)水平.结果 该方法标准曲线的批内变异系数(CV)为3.87%,批间CV平均为4.44%;平均回收率为95.8%,灵敏度达12.0 ng/mL.肝癌患者血清GP73水平均明显高于对照组、肝炎组和肝硬化组(P<0.05).GP73对原发性肝癌诊断灵敏度为85.7%,而AFP为62.3%;而早期肝癌中GP73和AFP灵敏度分别为76.7%、36.7%.结论 成功建立基于抗体-适配子夹心的GP73 ELISA检测方法,该方法可用于临床检测GP73水平.