目的 对抗人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)单克隆抗体H5识别的抗原表位区域进行鉴定.方法 设计4个NGAL截短体,通过PCR扩增截短体DNA片段并克隆到PET42a质粒中表达GST-NGAL截短体融合短肽.以此为抗原鉴定H5识别的抗原表位区域.随后根据生物信息学预测结果,化学合成2段潜在B细胞表位肽,用ELISA和Western blot方法进一步鉴定.结果 H5能与NGAL蛋白分子第20~36位氨基酸结合.结论 单克隆抗体H5的抗原表位结合位点存在于成熟NGAL蛋白分子氨基末端第20~36位氨基酸处,其深入研究为建立高效灵敏的NGAL免疫学检测体系和进一步研究NGAL分子抗原表位结构奠定基础.
作者:何莹;胡川闽;陈安
来源:国际检验医学杂志 2018 年 39卷 21期