目的 解决临床工作中应用实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测EB病毒(EBV)载量与临床诊断不符的问题,探讨微滴式数字PCR(ddPCR)和qPCR方法检测EBV载量的能力并为临床提供可能的解决方案.方法 收集510例疑似EBV感染相关疾病患者血浆标本,采用ddPCR和qPCR两种方法测定同一血浆标本的EBV-DNA载量.结果 EBV感染人群中,EBV-DNA载量较其他地区低,载量中位数仅360 copies/mL,其中初诊未治鼻咽癌患者中位病毒载量为4590 copies/mL,治疗后鼻咽癌患者中位病毒载量下降为430 co pies/m L,免疫力低下者中位病毒载量为130 co pies/m L,而淋巴瘤患者中位病毒载量为840 co pies/m L;qPCR检测EBV感染以400 copies/mL为界值,高于400 copies/mL时,ddPCR与qPCR的EBV-DNA测定水平值呈中度相关(r=0.533,P<0.05),低于400 copies/mL时,ddPCR与qPCR的EBV-DNA测定水平值呈弱相关(r=0.2995,P<0.05);以ddPCR为标准,qPCR检测EBV-DNA的灵敏度仅为0.317,以ddPCR检测结果为标准,构建qPCR的受试者工作特征曲线下面积为0.871,此时临界值(qPCR)为10 copies/mL,灵敏度为0.824,特异度为0.780.结论 采用ddPCR方法或优化qPCR的临界值去检测EBV-DNA载量更能为临床诊断EB V感染提供有利支持.
作者:王心仪;周娟;刘颖;应斌武
来源:国际检验医学杂志 2020 年 41卷 4期