目的 了解体外胰岛素对原代培养大鼠骨骼肌细胞脂联素受体1表达的影响.方法 体外原代培养骨骼肌细胞,应用SYBR Green Ⅰ染料建立一种快速、可靠的实时定量PCR,对其主要要素进行优化.观察不同胰岛素浓度不同作用时间下,大鼠骨骼肌细胞脂联素受体基因表达水平的动态变化.结果 建立敏感、特异、快速检测脂联素受体1 mRNA的实时定量PCR方法,随着胰岛素浓度的增加,脂联素受体1表达逐渐降低.在较低浓度(胰岛素浓度<1 nmol/L)时,脂联素受体1表达的降低无统计学意义,当胰岛素浓度增加到10 nmol/L及以上时,骨骼肌细胞脂联素受体1表达的降低有统计学意义(P<0.05),这种抑制作用1 h后出现,24 h后达到高峰.结论 成功地建立SYBRGreen Ⅰ实时定量PCR检测脂联素受体基因的表达方法,体外高胰岛素对骨骼肌细胞脂联素受体1mRNA表达有抑制作用,并呈时间和剂量依赖性.
作者:刘小莺;林益川;刘礼斌
来源:国际内分泌代谢杂志 2007 年 27卷 3期