目的:观察miR-101在肺癌细胞或组织中的表达变化情况,分析miR-101通过靶向调控环磷腺苷反应元件结合蛋白1(cyclic adenosine monophosphate responsive element binding protein 1,CREB1)对肺癌发生发展的影响.方法:实时聚合酶链反应检测肺癌组织,癌旁正常组织,直径≤5 cm,>5 cm,转移,无转移肺癌组织中的miR-101表达量以及各株肺癌细胞中miR-101与mRNA的表达量.MicroRNA靶基因数据库与荧光素酶报告基因检验CREB1为miR-101的潜在靶基因.实时聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测miR-101 mimics对CREB1 mRNA及蛋白表达的影响.实时聚合酶链反应检测肿瘤组织与癌旁正常组织CREB1 mRNA的表达量;免疫组织化学检测肿瘤组织和癌旁正常组织中CREB1的表达量.CCK-8检测各转染组的光密度(optical density,OD)值;流式细胞术检测细胞比值.Tranwell迁移实验和细胞划痕实验检测细胞迁移能力.观察21 d裸鼠肿瘤体积及质量;检测miR-101在miR-101 mimics转染组裸鼠肿瘤组织中的表达量;增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)染色检测裸鼠肿瘤细胞增殖情况.结果:与癌旁正常组织相比,肺癌组织中miR-101的表达量显著降低;转移的肺癌组织中miR-101的表达量显著低于无转移肿瘤组织;直径≤5 cm的肿瘤中miR-101的表达
作者:李慧敏;姜东亮;张韧;王妮妮
来源:临床与病理杂志 2019 年 39卷 12期