目的 探讨血小板反应素4(Thbs4)基因编辑骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对糖尿病后肢缺血大鼠血管内皮生长因子(VEGF)和促血管生成素-1(Ang-1)的影响及相关作用机制.方法 将30只Sprague-Dawley大鼠随机分为模型组、模型+BMSCs治疗组及模型+Thbs4-BMSCs治疗组,每组10只.各组大鼠在构建Ⅱ型糖尿病后肢缺血模型后,分别于缺血损伤区局部注射100μl的生理盐水、BMSCs悬液和Thbs4-BMSCs悬液(细胞数为2×106个).干细胞移植后第14天处死大鼠,取缺血区域附近的肌肉组织,分别采用蛋白质印迹法(Western Blot)检测VEGF及磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)蛋白的表达,免疫荧光染色检测Ang-1蛋白的表达,实时荧光定量PCR检测VEGF和Ang-1基因的mRNA表达,免疫组化染色检测血管性血友病因子(vWF)蛋白的表达.结果 模型+Thbs4-BMSCs治疗组的VEGF、Ang-1及vWF蛋白表达均明显高于模型组和模型+BMSCs治疗组(VEGF蛋白:P<0.01,P<0.05);VEGF和Ang-1基因的mRNA表达较模型组和模型+BMSCs治疗组均明显上调,差异均具有统计学意义(VEGF mRNA:均P<0.01;Ang-1 mRNA:P<0.01,P<0.05);p-Smad2/3蛋白表达也明显高于模型组和模型+BMSCs治疗组(均P<0.01),且加入p-Smad2/3通路抑制剂后p-Smad2/3蛋白表达明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 Thbs4-BMSC

作者：武相锋；汪涛；刘韬；徐富刚；张倩

来源：国际生物医学工程杂志 2019 年 42卷 4期