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目的:研究常用组织材料脱细胞试剂十二烷基硫酸钠(SDS)、聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)和硫代甜菜碱10(SB-10)的残留量与细胞毒性的相关性,并找出控制试剂残留的安全阈值。方法:参照GB/T 16886.5中的细胞毒性检测方法,分别检测不同质量浓度的SDS、Triton X-100、SB-10对L-929细胞和MC3T3-E1细胞的细胞毒性。细化上述3种脱细胞试剂的质量浓度区间,确定单种试剂残留无细胞毒性的阈值。将3种试剂两两混合或3种共混,通过细胞毒性实验确定试剂混合后无细胞毒性的阈值。结果:SDS、Triton X-100和SB-10对L-929细胞产生细胞毒性的临界浓度分别为4×10 -3、2×10 -2和6×10 -1 mg/ml,对MC3T3-E1细胞产生细胞毒性的临界浓度分别为6×10 -3、4×10 -2和2 mg/ml。3种试剂细胞毒性大小趋势为SDS>Triton X-100>SB-10。将临界浓度的3种试剂两两混合或3种共混,对L-929细胞和MC3T3-E1细胞均无细胞毒性。 结论:采用上述3种脱细胞试剂制备脱细胞支架时应采用多种试剂清洗工序,高效清洗组织使试剂残留量低于临界值,以确保脱细胞支架的生物安全性。

作者:周建伟;白玉龙;李淼;沈亚俊;李矛

来源:国际生物医学工程杂志 2021 年 44卷 6期

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作者:
周建伟;白玉龙;李淼;沈亚俊;李矛
来源:
国际生物医学工程杂志 2021 年 44卷 6期
标签:
表面活性剂 细胞毒性 脱细胞基质 Surfacetant Cytotoxicity Acellular matrix
目的:研究常用组织材料脱细胞试剂十二烷基硫酸钠(SDS)、聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)和硫代甜菜碱10(SB-10)的残留量与细胞毒性的相关性,并找出控制试剂残留的安全阈值。方法:参照GB/T 16886.5中的细胞毒性检测方法,分别检测不同质量浓度的SDS、Triton X-100、SB-10对L-929细胞和MC3T3-E1细胞的细胞毒性。细化上述3种脱细胞试剂的质量浓度区间,确定单种试剂残留无细胞毒性的阈值。将3种试剂两两混合或3种共混,通过细胞毒性实验确定试剂混合后无细胞毒性的阈值。结果:SDS、Triton X-100和SB-10对L-929细胞产生细胞毒性的临界浓度分别为4×10 -3、2×10 -2和6×10 -1 mg/ml,对MC3T3-E1细胞产生细胞毒性的临界浓度分别为6×10 -3、4×10 -2和2 mg/ml。3种试剂细胞毒性大小趋势为SDS>Triton X-100>SB-10。将临界浓度的3种试剂两两混合或3种共混,对L-929细胞和MC3T3-E1细胞均无细胞毒性。 结论:采用上述3种脱细胞试剂制备脱细胞支架时应采用多种试剂清洗工序,高效清洗组织使试剂残留量低于临界值,以确保脱细胞支架的生物安全性。