目的:构建哺乳动物极性蛋白mInscuteable C末端257～532位氨基酸结构域与谷胱甘肽巯基转移酶(GST)的融合蛋白GST-mInsc 257～532的原核表达载体,在大肠杆菌中表达并纯化该融合蛋白.方法:将已经构建好的mInsc 257～532位氨基酸序列克隆至原核表达载体pGEX-4T中,构建重组的质粒pGEX-4T/mInsc 257～532；将重组质粒转化感受态细菌BL21,异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达GST蛋白；经谷胱甘肽-琼脂糖球珠分离纯化；产物经SDS-PAGE电泳及Western Blot鉴定.结果:获得高表达及纯化的pGEX-4T/mInsc 257～532融合蛋白.结论:成功构建重组pGEX-4T/mInsc 257～532原核表达载体；诱导表达pGEX-4T/mInsc 257～532融合蛋白并纯化.
作者：肖卓妮；徐望明；杨菁
来源：神经损伤与功能重建 2012 年 07卷 4期
