目的:观察自噬抑制剂对脊髓损伤后髓鞘碱性蛋白(MBP)表达的影响。方法:将99只大鼠随机分成假手术组、损伤组和干预组各33只,各组再分成损伤后3、7、14 d 3个时间点,应用打击器制备 T10脊髓损伤模型。干预组造模前注射1μL 3-甲基腺嘌呤(3-MA)。假手术组不造成打击。提取脊髓样本进行 Western blot和实时定量荧光 PCR 检测自噬相关蛋白 LC3-Ⅱ和 MBP 的蛋白、mRNA 水平。用 BBB 行为学评分分别于伤后1、7、14 d 评估大鼠。结果:伤后14 d 时干预组的 BBB 评分明显高于损伤组(P=0.001)。损伤组各时间点大鼠脊髓损伤区域的 LC3-Ⅱ蛋白含量较假手术组明显增加(P<0.05),干预组损伤区域的 LC3-ⅡmRNA 和蛋白水平在伤后3、7、14 d 均比损伤组减少(P<0.05)。干预组大鼠损伤区域的 MBP mRNA 和蛋白水平在伤后3、7、14 d 均比损伤组增加(P<0.05)。结论:大鼠脊髓损伤后存在自噬的过度激活,自噬抑制剂可通过减少脊髓损伤后 MBP 的丢失发挥神经保护作用。
作者:杨德刚;李建军;杨明亮;杜良杰;褚宏宇;胡安明;高峰;李军;顾蕊
来源:神经损伤与功能重建 2015 年 3期