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目的 比较piggyBac( PB)转座子和Tol2转座子介导基因整合到细胞基因组中并实现长期表达的能力,探索将转座子作为一种研究基因长期表达的工具.方法 采用荧光蛋白和分泌型碱性磷酸酶(secreted alkaline phosphatase,SEAP)作为报告基因,利用PB转座子和Tol2转座子在CHO细胞和HEK 293T细胞中进行细胞转染实验,在传代前和传代后的不同时间点持续监测报告基因表达量的变化情况.结果 与不加转座酶的对照组相比,瞬时转染CHO细胞和HEK 293T细胞后,PB转座子和Tol2转座子能促进携带的荧光蛋白和SEAP报告基因的表达,并且能够长期表达,PB转座子介导报告基因长期表达的效果优于Tol2转座子.结论 PB转座子介导基因长期表达的能力强于Tol2转座子,PB转座子更适于研究基因的长期表达.

作者:李国保;卢大儒

来源:国际遗传学杂志 2012 年 35卷 5期

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作者:
李国保;卢大儒
来源:
国际遗传学杂志 2012 年 35卷 5期
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piggyBac转座子 Tol2转座子 基因长期表达 piggyBac transposon Tol2 transposon Long-term gene expression
目的 比较piggyBac( PB)转座子和Tol2转座子介导基因整合到细胞基因组中并实现长期表达的能力,探索将转座子作为一种研究基因长期表达的工具.方法 采用荧光蛋白和分泌型碱性磷酸酶(secreted alkaline phosphatase,SEAP)作为报告基因,利用PB转座子和Tol2转座子在CHO细胞和HEK 293T细胞中进行细胞转染实验,在传代前和传代后的不同时间点持续监测报告基因表达量的变化情况.结果 与不加转座酶的对照组相比,瞬时转染CHO细胞和HEK 293T细胞后,PB转座子和Tol2转座子能促进携带的荧光蛋白和SEAP报告基因的表达,并且能够长期表达,PB转座子介导报告基因长期表达的效果优于Tol2转座子.结论 PB转座子介导基因长期表达的能力强于Tol2转座子,PB转座子更适于研究基因的长期表达.