目的 在研究辛伐他汀(SIM)诱导骨髓间充质干细胞(BMSC)成骨分化作用的基础上,结合应用Hedgehog信号通路阻断剂环巴胺cyclopamine(Cpn),探讨Hedgehog通路是否参与辛伐他汀刺激BMSC成骨分化的过程.方法 采用全骨髓贴壁培养法提取大鼠BMSC,在诱导培养基(CM)、含SIM或SIM+Cpn的诱导培养基中培养.采用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色法,检测细胞中ALP的表达;通过免疫荧光染色观察细胞中Gli1及骨钙素(osteocalcin,OCN)的表达;采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法,检测细胞中Gli1、ALP、Ⅰ型胶原(collagen type Ⅰ,COLI)及OCN mRNA的表达;采用蛋白质印迹技术,分析细胞中Gli1、Runx2、COLI及OCN的表达,通过茜素红染色检测细胞钙结节形成及基质矿化能力.结果 SIM组ALP表达水平显著高于CM组(P＜0.05),而SIM+Cpn组ALP表达水平则显著低于SIM组(P＜0.05),但仍高于CM组.免疫荧光检测显示,SIM在有(无)Cpn存在的情况下均可促进Gli1及OCN的表达;给药第10和18天SIM组Gli1、ALP、OCN及COLI mRNA表达水平均显著高于CM组(P＜0.05),且这种改变不能被Cpn完全阻断;给药第10和18天SIM组Gli1、Runx2、COLI及OCN蛋白表达显著高于CM组(P＜0.05),SIM+Cpn组显著低于SIM组(P＜0.05).茜素红染色结果提示,SIM组基质矿化能力显著高于CM

作者：郭志斌；迟博婧；张钰英；吴春芳；刘子洪；邢磊；张国彬

来源：国际药学研究杂志 2019 年 46卷 11期