目的 探讨采用超声辐照联合微泡造影剂增强重组表达质粒plRES-EGFP-sTRAIL转染肝癌细胞的有效性.方法 构建携带肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体(TRAIL)基因及绿色荧光蛋白(GFP)的真核表达质粒pIBES-EGEP-sTRAIL,转染肝癌细胞HepG2,分为超声辐照联合微泡造影剂转染组、脂质体转染组、单纯微泡造影剂转染组及对照组.荧光显微镜检测GFP以评价转染效率,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)检测细胞生长抑制率,Hoechst33258荧光染色观察细胞形态变化,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测TRAIL凋亡途径中关键凋亡分子caspase-8和caspase-3的蛋白变化.结果 超声辐照联合微泡造影剂可增强pIREs-EGFP-sTRAIL有效转染HepG2细胞,其转染效率与脂质体转染组、单纯微泡造影剂组及对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);携带sTRAIL基因的表达质粒能够激活caspase通路,促进肝癌细胞凋亡,有效抑制肝癌细胞生长.结论 构建的真核表达载体pIRES-EGFP-sTRAIL在肝癌细胞中能有效表达,联合超声微泡造影剂及低强度超声,可显著增强sTRAIL对肝癌细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用.
作者：夏金堂；蔡文松；徐波；伍兆锋；翁杰锋；李雯
来源：国际肿瘤学杂志 2008 年 35卷 6期
