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目的 探讨dsP21-555转染对肾透明细胞癌细胞株ACHN和786-O中抑癌基因p21表达的影响.方法 肾透明细胞癌细胞分别使用脂质体Lipofectamine 3000转染dsControl和dsP21-555.荧光实时定量PCR(RT-qPCR)及Western blotting分别检测分析p21 mRNA及蛋白的表达情况.流式细胞术(FCM)检测细胞周期分布,使用细胞活力实验(MTS法)和集落培养实验分析细胞活力和增殖能力.结果 在ACHN和786-O细胞株中,dsP21-555组p21 mRNA的表达(2.86±0.33、1.96±0.35)相比dsControl组(1.05±0.34、1.01±0.14),分别升高至2.72倍(t=7.640,P<0.001)和1.95倍(t=5.058,P=0.002).Western blotting实验证明两种细胞株中P21蛋白表达水平的上升与p21 mRNA上调相一致.FCM结果显示,转染dsP21-555后,细胞周期被阻滞在G0-G1期(57.08

作者:黄耿;姜卫东;毛青;桂定文

来源:国际肿瘤学杂志 2017 年 44卷 7期

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作者:
黄耿;姜卫东;毛青;桂定文
来源:
国际肿瘤学杂志 2017 年 44卷 7期
标签:
肾肿瘤 癌基因蛋白质p21(ras) 细胞增殖 dsP21-555 Kidney neoplasms Oncogene protein p21 (ras) Cell proliferation dsP21-555
目的 探讨dsP21-555转染对肾透明细胞癌细胞株ACHN和786-O中抑癌基因p21表达的影响.方法 肾透明细胞癌细胞分别使用脂质体Lipofectamine 3000转染dsControl和dsP21-555.荧光实时定量PCR(RT-qPCR)及Western blotting分别检测分析p21 mRNA及蛋白的表达情况.流式细胞术(FCM)检测细胞周期分布,使用细胞活力实验(MTS法)和集落培养实验分析细胞活力和增殖能力.结果 在ACHN和786-O细胞株中,dsP21-555组p21 mRNA的表达(2.86±0.33、1.96±0.35)相比dsControl组(1.05±0.34、1.01±0.14),分别升高至2.72倍(t=7.640,P<0.001)和1.95倍(t=5.058,P=0.002).Western blotting实验证明两种细胞株中P21蛋白表达水平的上升与p21 mRNA上调相一致.FCM结果显示,转染dsP21-555后,细胞周期被阻滞在G0-G1期(57.08