目的:探讨赖氨酰氧化酶(LOX)和XRCC5在人乳腺癌细胞内是否存在相互作用.方法:构建含有LOX全长及插入LOX基因序列C端的2个StrepⅡ和一个Flag标签的慢病毒表达载体GV303/EGFP(LOX-SF),经酶切鉴定正确后,将其转染MDA-MB-231人乳腺癌细胞,使用荧光定量PCR和蛋白质印迹实验对细胞中重组蛋白LOX-SF进行检测.利用免疫共沉淀技术验证LOX与XRCC5之间的相互作用,并通过间接免疫荧关分析LOX与XRCC5在MDA-MB-231人乳腺癌细胞的定位情况.结果:重组LOX蛋白在MDA-MB-231人乳腺癌细胞中稳定表达.LOX抗体免疫共沉淀下来的蛋白复合物中检测到XRCC5,同时XRCC5抗体免疫共沉淀下来的蛋白复合物中也检测到LOX.利用间接免疫荧光分析,LOX与XRCC5在细胞核内存在共定位.结论:LOX与XRCC5在人乳腺癌细胞内存在相互作用,并且在细胞核内共定位.
作者：周文婷；刘剑仑；刘侠；杨华伟；韦薇
来源：广西医科大学学报 2016 年 33卷 1期
