目的:探讨携带绿色荧光蛋白的腺病毒载体(Ad-GFP)转染兔脂肪干细胞(rADSCs)后对其生长增殖及成脂分化的影响.方法:取新西兰大白兔(1.5～2.0 kg、8～12周龄)腹股沟皮下脂肪垫3 mL,采用贴壁法体外分离培养rADSCs.取第3代rADSCs细胞分为Ad-GFP转染组(A组)和未转染的对照组(B组),流式细胞术检测Ad-GFP转染rADSCs的效率.比色法检测两组细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性,四氮唑复合物(XTT)比色法检测rADSCs的增殖情况.细胞成脂分化14 d后行油红O染色,检测脂肪细胞分化率及细胞内脂滴含量.结果:两组rADSCs表面标志物CD29、CD44、CD90、CD105阳性表达率均在95％以上.不同MOI值rADSCs转染效率不同,当MOI值为10、30、50、100时转染效率分别为11.2％、42.7％、95.3％、97.1％.Ad-GFP转染后的rASCs贴壁后呈梭形,细胞质丰富,保持了良好的正常形态.两组rASCs培养上清液中LDH含量及rADSCs增殖情况比较,差异均无统计学意义(均P＞0.05).两组细胞分化率和细胞内脂滴含量比较,差异均无统计学意义(均P ＞0.05).结论:Ad-GFP转染rADSCs后,GFP可在细胞内稳定表达,对细胞无明显毒性作用,不影响rAD-SCs的生长、增殖及成脂化能力,是一种理想的脂肪干细胞示踪标记方法.
作者：陈海；梁至洁；梁一丹；黎洪棉
来源：广西医科大学学报 2016 年 33卷 6期
