目的:探讨在营养缺乏的肿瘤微环境中,敲低鞘氨醇激酶1 (SphK1)后调控的自噬对人结肠癌RKO细胞增殖的影响及其机制.方法:Western blot检测正常结肠黏膜细胞ncm460和结肠癌RKO细胞SphK1表达、细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路和自噬水平差异;用平衡盐溶液EBSS以不同干预时间(0h、2h、4h、6h)处理结肠癌RKO细胞,选取自噬激活最明显的时间进行后续实验;采用慢病毒siRNA-NC和siRNA-SphK1转染结肠癌RKO细胞;在EBSS干预4h模拟营养缺乏的肿瘤微环境下,用CCK8和Westem blot分别检测对照组(NC-RKO)和低表达SphK1组[SphK1 (-)-RKO]细胞的存活率和SphK1、p-ERK和自噬水平的变化;再以ERK抑制剂u0126(10 μnol/L)、自噬抑制剂3-MA(10 mmol/L)处理NC-RKO细胞,用CCK8和Western blot分别检测各组细胞的存活率和p-ERK、自噬水平的变化.结果:与正常结肠黏膜细胞ncm460相比,结肠癌细胞中SphK1、p-ERK、自噬水平均增加;在营养缺乏的肿瘤微环境下,低表达的SphK1抑制细胞的存活率,降低p-ERK、自噬水平;u0126和3MA处理后抑制NC-RKO细胞的增殖活性,降低自噬水平,u0126处理能够降低p-ERK的表达,而3MA处理后p-ERK无明显改变,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:在营养缺乏的肿瘤微环境中,抑制SphK1能有效抑制结肠癌细胞的增殖,其机制

作者：林兰；朱丽叶；罗世波；吴江妮；刘诗权

来源：广西医科大学学报 2020 年 37卷 3期