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目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)HAGLROS对高糖(HG)诱导的心肌细胞H9c2增殖和凋亡的影响及作用机制.方法:H9c2细胞分为对照组(NC组,细胞正常培养)、HG组(33mmol/L葡萄糖作用细胞24h)、HG+si-NC组(33mmol/L葡萄糖作用转染si-NC的细胞24 h)、HG+si-HAGLROS组(33 mmol/L葡萄糖作用转染si-HAGLROS的细胞24 h)、HG+miR-NC组(33mmol/L葡萄糖作用转染miR-NC的细胞24h)、HG+miR-20a-5p组(33mmol/L葡萄糖作用转染miR-20a-5p mimics的细胞24 h)、HG+si-HAGLROS+anti-miR-NC组(33 mmol/L葡萄糖作用于共转染si-HAGLROS与anti-miR-NC 的细胞24 h)和HG+si-HAGLROS+anti-miR-20a-5p组(33 mmol/L葡萄糖作用于共转染si-HAGLROS与anti-miR-20a-5p的细胞24 h),实时荧光定量PCR(qPCR)检测细胞中HAGLROS和miR-20a-5p表达,四甲基噻唑蓝染色法(MTT)、流式细胞术和蛋白印迹(Western blot-ting)分别检测细胞存活率、凋亡率及细胞周期蛋白Dl(CyclinDl)、活化的半胱天冬酶-3(cleaved-caspase-3)、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)和磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)的蛋白表达的影响.双荧光素酶报告基因实验验证HAGLROS与miR-20a-5p调控关系.结果:与NC组比较,HG组HAGLROS水平升高(P<0.05),miR-20a-5p水平降低(P<0.05),H9c2细胞存活率和CyclinDl

作者:刘晓东;刘晓琴;党宏伟;赵玲

来源:广西医科大学学报 2020 年 37卷 12期

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刘晓东;刘晓琴;党宏伟;赵玲
来源:
广西医科大学学报 2020 年 37卷 12期
标签:
HAGLROS miR-20a-5p 高糖 心肌细胞 增殖 凋亡
目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)HAGLROS对高糖(HG)诱导的心肌细胞H9c2增殖和凋亡的影响及作用机制.方法:H9c2细胞分为对照组(NC组,细胞正常培养)、HG组(33mmol/L葡萄糖作用细胞24h)、HG+si-NC组(33mmol/L葡萄糖作用转染si-NC的细胞24 h)、HG+si-HAGLROS组(33 mmol/L葡萄糖作用转染si-HAGLROS的细胞24 h)、HG+miR-NC组(33mmol/L葡萄糖作用转染miR-NC的细胞24h)、HG+miR-20a-5p组(33mmol/L葡萄糖作用转染miR-20a-5p mimics的细胞24 h)、HG+si-HAGLROS+anti-miR-NC组(33 mmol/L葡萄糖作用于共转染si-HAGLROS与anti-miR-NC 的细胞24 h)和HG+si-HAGLROS+anti-miR-20a-5p组(33 mmol/L葡萄糖作用于共转染si-HAGLROS与anti-miR-20a-5p的细胞24 h),实时荧光定量PCR(qPCR)检测细胞中HAGLROS和miR-20a-5p表达,四甲基噻唑蓝染色法(MTT)、流式细胞术和蛋白印迹(Western blot-ting)分别检测细胞存活率、凋亡率及细胞周期蛋白Dl(CyclinDl)、活化的半胱天冬酶-3(cleaved-caspase-3)、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)和磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)的蛋白表达的影响.双荧光素酶报告基因实验验证HAGLROS与miR-20a-5p调控关系.结果:与NC组比较,HG组HAGLROS水平升高(P<0.05),miR-20a-5p水平降低(P<0.05),H9c2细胞存活率和CyclinDl