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目的:探讨不同年龄大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)来源的外泌体(BMSCs-Exos)对血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化的影响及机制.方法:提取年轻大鼠和老年大鼠的BMSCs并进行鉴定,收集细胞培养上清中的外泌体并鉴定.将VSMCs分为4组:空白对照组、β-甘油磷酸钠(β-GP)组、β-GP+年轻大鼠BMSCs-Exos(Young-Exos)组和β-GP+老年大鼠BMSCs-Exos(Aged-Exos)组.除空白对照组外,其他3组用含10 mmol/L β-GP的完全培养基培养14 d,诱导VSMCs钙化;茜素红S染色法检测各组钙化情况;Western blotting法检测特异蛋白1(Spl)、成骨转化标志蛋白Runt相关转录因子2重组蛋白(RUNX2)和a平滑肌肌动蛋白(aSMA)的蛋白表达.结果:与空白对照组比较,β-GP组出现颜色较深的橘红色钙盐结节,β-GP+Young-Exos组较β-GP组和β-GP+Aged-Exos组钙盐结节数量明显减少,且橘红色着色浅.与空白对照组比较,β-GP组Sp1和RUNX2蛋白表达量升高,aSMA蛋白表达量降低(均P<0.05);与β-GP组比较,β-GP+Young-Exos组Spl和RUNX2蛋白表达量降低,aSMA蛋白表达量升高(均P<0.05),而β-GP+Aged-Exos组与β-GP组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论:不同年龄大鼠BMSCs-Exos对动脉钙化的影响不同,其中Young-Exos干预能减轻VSMCs钙化,其机制可能与下调Spl和RUNX2表达、上调

作者:李耀东;陈传珍;卢海林;杨晗;林秋宁;胡明;覃晓

来源:广西医科大学学报 2021 年 38卷 2期

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作者:
李耀东;陈传珍;卢海林;杨晗;林秋宁;胡明;覃晓
来源:
广西医科大学学报 2021 年 38卷 2期
标签:
血管钙化 外泌体 骨髓间充质干细胞 Sp1
目的:探讨不同年龄大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)来源的外泌体(BMSCs-Exos)对血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化的影响及机制.方法:提取年轻大鼠和老年大鼠的BMSCs并进行鉴定,收集细胞培养上清中的外泌体并鉴定.将VSMCs分为4组:空白对照组、β-甘油磷酸钠(β-GP)组、β-GP+年轻大鼠BMSCs-Exos(Young-Exos)组和β-GP+老年大鼠BMSCs-Exos(Aged-Exos)组.除空白对照组外,其他3组用含10 mmol/L β-GP的完全培养基培养14 d,诱导VSMCs钙化;茜素红S染色法检测各组钙化情况;Western blotting法检测特异蛋白1(Spl)、成骨转化标志蛋白Runt相关转录因子2重组蛋白(RUNX2)和a平滑肌肌动蛋白(aSMA)的蛋白表达.结果:与空白对照组比较,β-GP组出现颜色较深的橘红色钙盐结节,β-GP+Young-Exos组较β-GP组和β-GP+Aged-Exos组钙盐结节数量明显减少,且橘红色着色浅.与空白对照组比较,β-GP组Sp1和RUNX2蛋白表达量升高,aSMA蛋白表达量降低(均P<0.05);与β-GP组比较,β-GP+Young-Exos组Spl和RUNX2蛋白表达量降低,aSMA蛋白表达量升高(均P<0.05),而β-GP+Aged-Exos组与β-GP组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论:不同年龄大鼠BMSCs-Exos对动脉钙化的影响不同,其中Young-Exos干预能减轻VSMCs钙化,其机制可能与下调Spl和RUNX2表达、上调