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目的:初步探讨红霉素(EM)对烟草烟雾提取物(CSE)诱导的人巨噬细胞炎症的抑制作用及其可能机制.方法:将体外培养的人单核细胞U937用佛波脂(PMA)诱导分化为人巨噬细胞.CCK-8法检测不同浓度、不同时间CSE及EM对细胞活性的影响.细胞分为对照组、CSE组(1%CSE刺激24 h或48 h)、CSE+EM组(1 μg/mL EM预孵育24 h或48 h后加1%CSE刺激24 h或48 h)、CSE+核因子(NF)-κB抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC)组(20nmol/LPDTC预孵育24h或48h后加1%CSE刺激24h或48h)、Ⅰ型组蛋白去乙酰化酶(HDAC3)抑制剂曲古霉素(TSA)组(100ng/mLTSA孵育24h).采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞培养上清中炎症介质白介素(IL)-8浓度,应用凝胶迁移率阻滞实验(EMSA)检测NF-κB的活性,Western blotting法检测HDAC3和NF-κB蛋白表达.结果:与对照组比较,CSE组IL-8浓度、NF-κB转录活性明显增高,HDAC3蛋白表达下降(P<0.05),TSA组HDAC3蛋白表达下降,NF-κB蛋白表达升高;与CSE组比较,CSE+EM组和CSE+PDTC组IL-8浓度、NF-κB转录活性及NF-κB蛋白表达明显下降,HDAC3蛋白表达升高(P<0.05).结论:EM能够抑制CSE诱导的人巨噬细胞炎症介质IL-8释放,其抗炎活性可能与抑制NF-κB的转录活性和表达以及上调HDAC3表达有关.

作者:霍健君;李梅华;马南;邱居烽;冷子杨;王绍霜;钟小宁;何志义

来源:广西医科大学学报 2021 年 38卷 4期

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作者:
霍健君;李梅华;马南;邱居烽;冷子杨;王绍霜;钟小宁;何志义
来源:
广西医科大学学报 2021 年 38卷 4期
标签:
烟草烟雾提取物 HDAC3 NF-κB IL-8 红霉素
目的:初步探讨红霉素(EM)对烟草烟雾提取物(CSE)诱导的人巨噬细胞炎症的抑制作用及其可能机制.方法:将体外培养的人单核细胞U937用佛波脂(PMA)诱导分化为人巨噬细胞.CCK-8法检测不同浓度、不同时间CSE及EM对细胞活性的影响.细胞分为对照组、CSE组(1%CSE刺激24 h或48 h)、CSE+EM组(1 μg/mL EM预孵育24 h或48 h后加1%CSE刺激24 h或48 h)、CSE+核因子(NF)-κB抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC)组(20nmol/LPDTC预孵育24h或48h后加1%CSE刺激24h或48h)、Ⅰ型组蛋白去乙酰化酶(HDAC3)抑制剂曲古霉素(TSA)组(100ng/mLTSA孵育24h).采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞培养上清中炎症介质白介素(IL)-8浓度,应用凝胶迁移率阻滞实验(EMSA)检测NF-κB的活性,Western blotting法检测HDAC3和NF-κB蛋白表达.结果:与对照组比较,CSE组IL-8浓度、NF-κB转录活性明显增高,HDAC3蛋白表达下降(P<0.05),TSA组HDAC3蛋白表达下降,NF-κB蛋白表达升高;与CSE组比较,CSE+EM组和CSE+PDTC组IL-8浓度、NF-κB转录活性及NF-κB蛋白表达明显下降,HDAC3蛋白表达升高(P<0.05).结论:EM能够抑制CSE诱导的人巨噬细胞炎症介质IL-8释放,其抗炎活性可能与抑制NF-κB的转录活性和表达以及上调HDAC3表达有关.