目的:探讨miR-22-3p在妊娠期糖尿病(GDM)患者胎盘外泌体中的表达及其对血管内皮细胞增殖、小管形成能力的影响和相关机制.方法:收集GDM患者与正常妊娠孕产妇的外周静脉血及胎盘组织,并从外周血中分离、鉴定胎盘外泌体.体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),采用脂质体转染技术对细胞中miR-22-3p进行过表达或敲低;采用高糖处理转染后的HUVEC,并将其分为阴性对照组(NC),高糖组(HG),高糖+miR-22-3pmimic组(HG+miR-22-3p mimic组);高糖+miR-22-3p inhibitor组(HG+miR-22-3p inhibitor组),HG+miR-NC组.CCK-8及小管形成实验分别检测上述各组HUVEC的增殖活性及成管能力;生物信息学分析并应用双荧光素酶基因报告实验检测miRNA-22-3p与神经导向因子Netrin-1的靶向调控关系;免疫组织化学染色检测Netrin-1在胎盘组织中的表达及定位;Speaman分析胎盘外泌体中miR-22-3p含量与胎盘组织中Netrin-1蛋白表达的相关性.结果:成功分离了胎盘外泌体;与正常妊娠组相比,miR-22-3p在GDM组胎盘外泌体中的表达增加;与NC组相比,HG组,HG+miR-22-3p mimic组、HG+miR-22-3p inhibitor和HG+miR-NC组细胞增殖活力及成管形成能力增加.而与HG组相比,miR-22-3p mimic组HUVEC的上述功能明显增加,但miR-22-3p inhibitor组却显著降低.双荧光素酶基因
作者:郑芳;肖新益
来源:广西医科大学学报 2021 年 38卷 8期