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目的:探讨S100A6调控磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路对黑色素瘤细胞(A375)增殖、侵袭和迁移影响.方法:首先将A375细胞分为4组:空白对照组(正常培养)、空载体对照组(转染pcDNA3.0空载体质粒)、S100A6转染组(转染pcDNA3.0-S 100A6质粒)、S100A6转染+抑制剂组(转染pcDNA3.0-S 100A6质粒与PI3K抑制剂LY294002).采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞S100A6 mRNA相对表达量;MTT法检测各组细胞增殖活力;Transwell检测各组细胞侵袭能力;划痕线法检测各组细胞的迁移能力;western blotting检测A375各组细胞PI3K/Akt信号通路相关分子PI3K、p-PI3K、GSK3β、Akt、p-Akt蛋白及c-Myc、CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平.结果:与空白对照组、空载体对照组相比,S100A6转染组细胞中S100A6mRNA表达水平显著升高(P<0.05),细胞存活率、侵袭细胞数和迁移细胞数均显著增高(P<0.05),细胞中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、GSK3β、c-Myc、CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);与S100A6转染组相比,S100A6转染+抑制剂组细胞中S100A6 mRNA表达水平无显著变化(P>0.05),细胞存活率、侵袭细胞数和迁移细胞数均显著降低(P<0.05),细胞中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、GSK3β、c-Myc、CyclinD1、MMP-2

作者:刘硕;常谨;刘英琦

来源:广西医科大学学报 2021 年 38卷 11期

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作者:
刘硕;常谨;刘英琦
来源:
广西医科大学学报 2021 年 38卷 11期
标签:
S100A6;磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路;增殖;侵袭;迁移
目的:探讨S100A6调控磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路对黑色素瘤细胞(A375)增殖、侵袭和迁移影响.方法:首先将A375细胞分为4组:空白对照组(正常培养)、空载体对照组(转染pcDNA3.0空载体质粒)、S100A6转染组(转染pcDNA3.0-S 100A6质粒)、S100A6转染+抑制剂组(转染pcDNA3.0-S 100A6质粒与PI3K抑制剂LY294002).采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞S100A6 mRNA相对表达量;MTT法检测各组细胞增殖活力;Transwell检测各组细胞侵袭能力;划痕线法检测各组细胞的迁移能力;western blotting检测A375各组细胞PI3K/Akt信号通路相关分子PI3K、p-PI3K、GSK3β、Akt、p-Akt蛋白及c-Myc、CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平.结果:与空白对照组、空载体对照组相比,S100A6转染组细胞中S100A6mRNA表达水平显著升高(P<0.05),细胞存活率、侵袭细胞数和迁移细胞数均显著增高(P<0.05),细胞中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、GSK3β、c-Myc、CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);与S100A6转染组相比,S100A6转染+抑制剂组细胞中S100A6 mRNA表达水平无显著变化(P>0.05),细胞存活率、侵袭细胞数和迁移细胞数均显著降低(P<0.05),细胞中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、GSK3β、c-Myc、CyclinD1、MMP-2