目的构建包装分泌型人内皮抑素（Endostatin）基因过表达慢病毒并表达。方法人工合成含人胰岛素信号肽和人Endostatin基因序列，利用pLVX-mCMV-ZsGreen载体质粒，构建慢病毒pLVX-hEndostatin-mCMV-ZsGreen质粒，通过293细胞包装制备慢病毒。利用重组慢病毒，转染肝干细胞，筛选胞外表达分泌型Endostatin的肝干细胞，观察其能否稳定表达。结果成功构建pLVX-hEndostatin-mCMV-ZsGreen，酶切鉴定及测序正确；该载体可通过293细胞包装慢病毒，该病毒携带人胰岛素信号肽和Endostatin基因序列，在肝干细胞中稳定表达分泌。ELISA检测Endostatin表达水平为18．58～34．20 ng/ml。结论分泌型人Endostatin基因过表达慢病毒成功制备并表达，可用于肿瘤血管生成相关实验。
作者：钟晓刚；殷舞；黄顺荣；麦威；刘斐；李雷；韦斌
来源：广西医学 2013 年 8期
