以西瓜尖镰孢菌诱导、提纯的豇豆抗真菌I类几丁质酶N端前10个氨基酸序列测定的基础上,设计合成了引物,运用PCR等分子生物学技术,从豇豆基因组中分离克隆了该特异几丁质酶成熟蛋白基因,测定分析了其全序列.该新基因全长894 bp,无内含子;具Aat I、Aat II、Bgl I、Dpn I、Dpn II、EcoR II、Hae I、Hae II、Hae III、Hinf I、Hpa II、Mae II、Mae III、Nba I、Oxa I和Sst IV酶切位点43个;豇豆与豇豆属(Unguiculata)、菜豆、豌豆、烟草、小麦、水稻的同源性依次递减.扩增克隆了菜豆几丁质酶信号肽基因,并将其与豇豆几丁质酶成熟蛋白基因连接,再与pBI 121重组,成功构建了特异几丁质酶基因的植物表达载体,为进一步培育抗真菌病转基因西瓜新品种打下了坚实基础.
作者：陈崇顺；斯琴巴拉
来源：广西植物 2002 年 22卷 4期
