在酿酒酵母中同时表达木糖还原酶基因(xyl1)和木糖醇脱氢酶基因(xyl2)可使酿酒酵母利用木糖发酵生成乙醇.但由于两种酶所依赖的辅酶不同导致酿酒酵母细胞内氧化还原失衡,致使中间产物大量积累,降低了乙醇产率.本研究从树干毕赤酵母中克隆了木糖醇脱氢酶基因,通过与银叶粉虱山梨醇脱氢酶[其活性依赖NADP+(H)]序列进行对比,确定突变位点,并利用融合PCR的方法进行定点突变.结果表明,突变体对辅酶NADP+(H)的亲和力有不同程度的提高,其中三点突变体的辅酶特性得到明显改变.本研究为构建高效利用木糖发酵生成乙醇的重组酿酒酵母奠定了基础.
作者：杨金莹；葛保胜；李燕；党宏月；吕建仁
来源：工业微生物 2011 年 41卷 2期
