为了实现来源于S.solfataricus的β-半乳糖苷酶的高效表达,对E.coli BL21 (DE3)/pT7-7-lacS基因工程菌的发酵培养基进行优化,获得最优的发酵培养基为:甘油浓度为10 g/L,蛋白胨浓度为18 g/L,酵母膏浓度为18 g/L,磷酸盐浓度为15 mmol/L,Mg2+离子浓度为5 mmol/L,乳糖诱导浓度为5 g/L.在优化条件下,β-半乳糖苷酶的酶活由初始的43.0 U/mL提高到83.4 U/mL.在此基础上,在3L发酵罐上进行了初步放大,于OD600 50时开始流加乳糖诱导,最终酶活达172.4U/mL,为摇瓶水平的2倍,为β-半乳糖苷酶的工业化生产奠定基础.
作者:吴玉飞;钱磊;张帆;陈晟;吴敬
来源:工业微生物 2012 年 42卷 6期