本文以重组大肠杆菌E.coli BL21(DE3)p ET30α(+)-Nmnat为研究对象,考察化学通透剂处理重组菌对其催化合成NADP的影响.实验显示,在单因素筛选实验中,四种通透剂曲拉通X-100、吐温80、二甲基亚砜和十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)对细胞进行通透化处理均可提高全细胞催化产率,且提高幅度差距并不显著.进一步采用析因设计考察四种通透剂的复合效应,除了曲拉通X-100与吐温80和曲拉通X-100与CTAB交互作用的P大于0.05为不显著,其余所有交互作用项P值均小于0.05,呈现显著性,且复合通透剂中,仅单一增加CTAB量,复合体系的协同作用将减少,制约作用增加,不适宜用于复合配方.最后采用中心组合设计进一步对复配效果进行优化,通过拟合得到最佳通透剂配比为曲拉通X-100(1.64％),吐温80(2.53％)以及二甲基亚砜(1.06％),此时NADP预测产率达到77.46％,与实际验证产率均值77.05％相差甚微,说明实验优化模型具有良好预测性,优化结果与未添加通透剂相比提升近47％,表明优化复合通透剂配方更有利于提高重组菌催化合成NADP.
作者：孙十凡；李红梅；卢环环；余带兵
来源：工业微生物 2019 年 49卷 1期
