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目的: 构建含人抑瘤素(HOSM)基因的重组腺病毒载体,观察其对肿瘤细胞生长的影响.方法: 用脂质体介导质粒DNA同源重组方法构建HOSM基因的重组缺陷型腺病毒载体,用聚合酶链反应(PCR)法鉴定所构建的ad-HOSM载体,在人胚肾细胞(293细胞)中扩增病毒.CsCl梯度超速离心纯化病毒,噬斑法测定病毒的滴度.结果: 获得了高纯度、高滴度的重组腺病毒载体.结论: 细胞内质粒DNA同源重组法能有效构建重组腺病毒载体,293细胞能有效扩增病毒.CsCl梯度超速离心法能制备高纯度的病毒,为进一步研究重组腺病毒介导HOSM基因对肿瘤细胞的生物学活性的影响打下基础.

作者:胡朝全;孙诚谊;孙连生;王玉芝

来源:贵阳医学院学报 2004 年 29卷 1期

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作者:
胡朝全;孙诚谊;孙连生;王玉芝
来源:
贵阳医学院学报 2004 年 29卷 1期
标签:
基因转移技术 腺病毒科 聚合酶链反应 抑瘤素M
目的: 构建含人抑瘤素(HOSM)基因的重组腺病毒载体,观察其对肿瘤细胞生长的影响.方法: 用脂质体介导质粒DNA同源重组方法构建HOSM基因的重组缺陷型腺病毒载体,用聚合酶链反应(PCR)法鉴定所构建的ad-HOSM载体,在人胚肾细胞(293细胞)中扩增病毒.CsCl梯度超速离心纯化病毒,噬斑法测定病毒的滴度.结果: 获得了高纯度、高滴度的重组腺病毒载体.结论: 细胞内质粒DNA同源重组法能有效构建重组腺病毒载体,293细胞能有效扩增病毒.CsCl梯度超速离心法能制备高纯度的病毒,为进一步研究重组腺病毒介导HOSM基因对肿瘤细胞的生物学活性的影响打下基础.