目的:评价血红素加氧酶-1(HO-1)对 HBV 复制的调控作用。方法采用分子克隆的方法分别构建人 HO-1真核表达载体---pHO 和 HO-1 RNA 干扰质粒---pHi,同 HBV 可复制性克隆 pHBV1.3体外共转染人肝癌细胞系Huh-7,检测 HBV 抗原分泌情况和 HBV 相关 mRNA 含量。利用 HBV 急性感染小鼠模型,腹腔注射钴原卟啉(CoPP)IX和锌原卟啉(ZnPP)IX 分别诱导和抑制 HO-1表达,检测血清 HO-1水平、HBV 效价,免疫组织化学染色观察 HBcAg 在肝细胞内表达情况。分别在细胞水平和动物体内水平,评价 HO-1表达对 HBV 复制的调控作用。结果同空载体共转染细胞相比,pHO 共转染后 HO-1的分泌水平明显上调(犘<0.01),HBsAg/HBeAg 的分泌受到抑制(均犘<0.01);pHi 共转染后 HO-1的分泌水平下降(犘<0.01),而 HBsAg/HBeAg 分泌增加(犘均<0.01);但各组 HBV 相关 RNA 水平无明显差异。CoPPIX 注射后诱导小鼠血清 HO-1高表达(犘<0.01),ZnPPIX 则有效抑制了 HO-1表达(犘<0.01)。同对照组相比,CoPPIX 组小鼠血清 HBV DNA 含量降低,肝脏内 HBcAg 阳性染色信号也随之明显减弱(犘均<0.01);而 ZnPPIX 组小鼠血清 HBV DNA 含量增加,肝脏内 HBcAg 表达明显增强(均犘<0.01)。结论上调 HO-1表达可
作者:李磊;韩华;金坤;刘磊;吴晓玲;高人焘
来源:肝脏 2013 年 10期