目的 探究人类肝细胞来源的肝前体样细胞(HepLPC)对巨噬细胞亚群M1及M2的影响.方法 采用肝细胞扩增培养体系(TEM)将原代肝细胞体外扩增转分化为HepLPC,培养过程收集HepLPC条件培养上清,离心后冻存备用.巨噬细胞为C57小鼠骨髓来源(BMDM),通过红细胞裂解处理后,加入小鼠GM-CSF 40 ng/mL培养,刺激诱导7 d,贴壁所得为实验所需巨噬细胞.处于静息状态的巨噬细胞,通过LPS 100 ng/mL刺激产生炎性状态的M1型巨噬细胞以及IL-440 ng/mL刺激产生具有抗炎及具有组织修复功能的M2型巨噬细胞.在定向诱导巨噬细胞极化的基础上,将HepLPC条件培养上清与不同极化状态的巨噬细胞共同培养,收集不同时间点的培养上清,细胞RNA和细胞蛋白,通过流式细胞术、定量PCR、ELISA等方法综合评价HepLPC条件培养上清对巨噬细胞不同亚群的影响.结果 小鼠GM-CSF刺激诱导BMDM贴壁,得到M0型巨噬细胞.F4/80+(巨噬细胞总标记)表达占比92.8％.流式细胞检测结果显示F4/80+,CD11c+表达占比88.1％;F4/80+,CD206+表达占比97.0％.LPS刺激6 h,M1相关炎性基因表达上调:IL6表达上调(823.200±174.500)倍,IL1β表达上调(8.389±0.029)倍,iNOS表达上调(24.650±1.196)倍;IL-4刺激6h,M2相关基因表达上升:CD206表达上调(114.000±3.579)倍,IL10表达上调(2.634±

作者：彭媛；周徐；景宏舒；朱雪晶；史瑶平；王涛；崔丹；施东华；丁敏；鄢和新；翟博

来源：肝脏 2021 年 26卷 6期