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目的 探究miR-203a-3p对肝癌细胞迁移和侵袭的影响及其作用机制.方法 体外培养HepG2细胞,将实验分为对照组(人肝癌细胞)、miRNA-NC组(转染阴性对照序列)和miR-203a-3p组(转染miR-203a-3p mimic).Transwell和细胞划痕实验用以检测细胞侵袭和迁移能力;双荧光素酶实验用以验证miR-203a-3p和锌指转录因子(SLUG)的靶向关系;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)用以检测miR-203a-3p和SLUG mRNA表达;蛋白质免疫印迹(WB)用以检测SLUG蛋白以及上皮间质转化相关蛋白E型钙黏蛋白(E-cadherin)、闭合蛋白(Occludin)、N型钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的表达;裸鼠成瘤实验用以检测转染后细胞体内成瘤能力.结果 与对照组相比,miRNA-NC组细胞侵袭和迁移能力、miR-203a-3p的表达、SLUG mRNA和蛋白的表达、上皮间质转化相关蛋白的表达均差异无统计学意义(P>0.05);miR-203a-3p组细胞侵袭和迁移能力、SLUG mRNA和蛋白的表达、N-cadherin、Vimentin蛋白表达显著降低,miR-203a-3p的表达、E-cadherin、Occludin蛋白表达显著升高(P<0.05).结论 miR-203a-3p可能靶向调控SLUG,抑制上皮间质转化过程,从而抑制肝癌细胞迁移及侵袭.

作者:张国柄;徐江海;王东风

来源:肝脏 2021 年 26卷 12期

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作者:
张国柄;徐江海;王东风
来源:
肝脏 2021 年 26卷 12期
标签:
miR-203a-3p;锌指转录因子;肝癌细胞;上皮间质转化;迁移;侵袭
目的 探究miR-203a-3p对肝癌细胞迁移和侵袭的影响及其作用机制.方法 体外培养HepG2细胞,将实验分为对照组(人肝癌细胞)、miRNA-NC组(转染阴性对照序列)和miR-203a-3p组(转染miR-203a-3p mimic).Transwell和细胞划痕实验用以检测细胞侵袭和迁移能力;双荧光素酶实验用以验证miR-203a-3p和锌指转录因子(SLUG)的靶向关系;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)用以检测miR-203a-3p和SLUG mRNA表达;蛋白质免疫印迹(WB)用以检测SLUG蛋白以及上皮间质转化相关蛋白E型钙黏蛋白(E-cadherin)、闭合蛋白(Occludin)、N型钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的表达;裸鼠成瘤实验用以检测转染后细胞体内成瘤能力.结果 与对照组相比,miRNA-NC组细胞侵袭和迁移能力、miR-203a-3p的表达、SLUG mRNA和蛋白的表达、上皮间质转化相关蛋白的表达均差异无统计学意义(P>0.05);miR-203a-3p组细胞侵袭和迁移能力、SLUG mRNA和蛋白的表达、N-cadherin、Vimentin蛋白表达显著降低,miR-203a-3p的表达、E-cadherin、Occludin蛋白表达显著升高(P<0.05).结论 miR-203a-3p可能靶向调控SLUG,抑制上皮间质转化过程,从而抑制肝癌细胞迁移及侵袭.