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目的:通过数据挖掘和细胞实验探究黄芪总皂苷(AST)通过调控lncRNA MIR22HG(MIR22HG)/Caspase-3对类风湿关节炎(RA)凋亡指标Bax、Caspase-3、Caspase-8和高凝指标PAF、PGI2的作用机制.方法:收集RA患者30例、正常人30例,提取外周血单个核细胞(PBMCs),定量逆转录PCR法(RT-qPCR)检测MIR22HG的表达,使用数据挖掘探索及其与凋亡、凝血指标的相关性.建立RA-FLS细胞系,构建MIR22HG过表达质粒,转染至RA-FLS中,用cell counting kit8(CCK-8)、RT-qPCR、酶联免疫吸附法(ELISA)、蛋白质免疫印迹法(WB)、免疫荧光法(IF)、流式细胞术检测黄芪总皂苷(AST)对RA-FLS的凋亡和凝血指标的影响.结果:与正常组相比,RA组MIR22HG高表达,PAF、Bcl-2mRNA升高,PGI2、Bax mRNA降低(P<0.05).Spearman相关性分析结果显示,MIR22HG与PAF、Bcl-2呈正相关,MIR22HG与PGI2、Bax呈负相关(P<0.05).关联规则结果显示,MIR22HG表达升高与Bax、PGI2降低和PAF、Bcl-2升高的支持度>45%、置信度均>95%、提升度均>1.CCK-8结果显示,AST对RA-FLS最佳干预浓度和时间分别为2 mg·mL-1和48 h.经AST处理后,RA-FLS中MIR22HG、Bcl-2蛋白表达降低,Bax、Caspase-3和Caspase-8蛋白表达升高,细胞凋亡增多,PAF降低、PGI2升高(均P<0.05).过表达MIR22HG,以上结果可逆.

作者:王馨;刘健;文建庭;忻凌;姜辉;万磊;孙玥;王桂珍;陈瑞莲

来源:广州医科大学学报 2022 年 50卷 2期

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作者:
王馨;刘健;文建庭;忻凌;姜辉;万磊;孙玥;王桂珍;陈瑞莲
来源:
广州医科大学学报 2022 年 50卷 2期
标签:
滑膜成纤维细胞 黄芪总皂苷 凋亡 凝血 lncRNA
目的:通过数据挖掘和细胞实验探究黄芪总皂苷(AST)通过调控lncRNA MIR22HG(MIR22HG)/Caspase-3对类风湿关节炎(RA)凋亡指标Bax、Caspase-3、Caspase-8和高凝指标PAF、PGI2的作用机制.方法:收集RA患者30例、正常人30例,提取外周血单个核细胞(PBMCs),定量逆转录PCR法(RT-qPCR)检测MIR22HG的表达,使用数据挖掘探索及其与凋亡、凝血指标的相关性.建立RA-FLS细胞系,构建MIR22HG过表达质粒,转染至RA-FLS中,用cell counting kit8(CCK-8)、RT-qPCR、酶联免疫吸附法(ELISA)、蛋白质免疫印迹法(WB)、免疫荧光法(IF)、流式细胞术检测黄芪总皂苷(AST)对RA-FLS的凋亡和凝血指标的影响.结果:与正常组相比,RA组MIR22HG高表达,PAF、Bcl-2mRNA升高,PGI2、Bax mRNA降低(P<0.05).Spearman相关性分析结果显示,MIR22HG与PAF、Bcl-2呈正相关,MIR22HG与PGI2、Bax呈负相关(P<0.05).关联规则结果显示,MIR22HG表达升高与Bax、PGI2降低和PAF、Bcl-2升高的支持度>45%、置信度均>95%、提升度均>1.CCK-8结果显示,AST对RA-FLS最佳干预浓度和时间分别为2 mg·mL-1和48 h.经AST处理后,RA-FLS中MIR22HG、Bcl-2蛋白表达降低,Bax、Caspase-3和Caspase-8蛋白表达升高,细胞凋亡增多,PAF降低、PGI2升高(均P<0.05).过表达MIR22HG,以上结果可逆.