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[目的]探讨地黄饮子对Aβ1-42诱导的SH-SY5Y细胞中RAGE/ROS/凋亡通路的影响.[方法](1)采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测胎牛血清组、 空白组及地黄饮子含药血清低、 中、 高剂量组的细胞活力,确定地黄饮子含药血清的最佳浓度和作用时间.(2)以0~20μmol/L Aβ1-42寡聚体处理SH-SY5Y细胞24 h和48 h后,采用MTT法检测细胞活力,Annexin V/碘化丙啶(PI)双染法观察细胞凋亡,确定Aβ1-42作用细胞的最佳浓度及时间,以建立阿尔茨海默病(AD)细胞模型.(3)采用MTT法检测空白组、 模型组、 西药对照组及地黄饮子含药血清低、 中、 高剂量组细胞活力,采用Annexin V/PI双染法观察各组细胞凋亡,采用二氢乙啶(DHE)染色法检测各组活性氧(ROS)含量,观察地黄饮子对Aβ1-42诱导的SH-SY5Y的细胞损伤的修复作用.(4)采用Western blot法检测空白组、 模型组、 地黄饮子含药血清中剂量组RAGE蛋白;进一步将Aβ1-42诱导的SH-SY5Y细胞进行RAGE转染后,采用DHE染色法检测各组ROS含量,采用Annexin V/PI双染法检测各组细胞凋亡率,观察地黄饮子对Aβ1-42诱导的SH-SY5Y细胞凋亡及RAGE表达的影响.[结果]作用时间为24 h时,地黄饮子含药血清低、中剂量组细胞活力较空白组均显著增强(P<0.05或P<0.01).建立AD体外模型的Aβ1-42浓度为5μmol/L,作用时

作者:朴钟源;魏亚芬;宋琳;敖丽梅;陆一婵;姜卓;姚丽芬;刘艳丽

来源:广州中医药大学学报 2017 年 34卷 4期

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作者:
朴钟源;魏亚芬;宋琳;敖丽梅;陆一婵;姜卓;姚丽芬;刘艳丽
来源:
广州中医药大学学报 2017 年 34卷 4期
标签:
地黄饮子/药理学 阿尔茨海默病 Aβ1-42 RAGE ROS 细胞凋亡 转染 细胞培养 Dihuang Yinzi/pharmacology Alzheimer's disease amyloid-beta1-42 (Aβ1-42) receptor for advanced glycation end product(RAGE) reactive oxygen species(ROS) cell apoptosis transfection cell culture
[目的]探讨地黄饮子对Aβ1-42诱导的SH-SY5Y细胞中RAGE/ROS/凋亡通路的影响.[方法](1)采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测胎牛血清组、 空白组及地黄饮子含药血清低、 中、 高剂量组的细胞活力,确定地黄饮子含药血清的最佳浓度和作用时间.(2)以0~20μmol/L Aβ1-42寡聚体处理SH-SY5Y细胞24 h和48 h后,采用MTT法检测细胞活力,Annexin V/碘化丙啶(PI)双染法观察细胞凋亡,确定Aβ1-42作用细胞的最佳浓度及时间,以建立阿尔茨海默病(AD)细胞模型.(3)采用MTT法检测空白组、 模型组、 西药对照组及地黄饮子含药血清低、 中、 高剂量组细胞活力,采用Annexin V/PI双染法观察各组细胞凋亡,采用二氢乙啶(DHE)染色法检测各组活性氧(ROS)含量,观察地黄饮子对Aβ1-42诱导的SH-SY5Y的细胞损伤的修复作用.(4)采用Western blot法检测空白组、 模型组、 地黄饮子含药血清中剂量组RAGE蛋白;进一步将Aβ1-42诱导的SH-SY5Y细胞进行RAGE转染后,采用DHE染色法检测各组ROS含量,采用Annexin V/PI双染法检测各组细胞凋亡率,观察地黄饮子对Aβ1-42诱导的SH-SY5Y细胞凋亡及RAGE表达的影响.[结果]作用时间为24 h时,地黄饮子含药血清低、中剂量组细胞活力较空白组均显著增强(P<0.05或P<0.01).建立AD体外模型的Aβ1-42浓度为5μmol/L,作用时