目的 研究细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白P21抑制人支气管上皮细胞凋亡的机制.方法 (1)表达细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白P21的质粒PEGFP-N1-p21转染人支气管上皮细胞系16HBE,研究P21蛋白在细胞质、细胞核内的表达变化与质粒转染后细胞凋亡表现之间的相互关系.实验分组包括空白对照、空质粒及PEGFP-N1-p21质粒组,应用Westen-blot方法检测质粒转染24 h后P21蛋白在细胞质、细胞核内的表达变化相对值,流式细胞仪方法检测质粒转染24 h、48 h后的细胞凋亡率.(2)转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激人支气管上皮细胞系16HBE,研究TGF-β1刺激后P21蛋白在细胞质、细胞核内的表达变化与支气管上皮细胞凋亡之间的相互关系.实验分组包括TGF-β10 ng/mL、TGF-β13 ng/mL及TGF-β110 ng/mL组,应用Westen-blot方法检测TGF-β1刺激24 h后P21蛋白在细胞质、细胞核内的表达变化,流式细胞仪方法检测TGF-β1刺激12 h、24 h后的细胞凋亡率.结果 质粒PEGFP-N1-p21转染人支气管上皮细胞系16HBE 24 h后,PEGFP-N1-p21质粒组的P21蛋白在细胞质内表达水平高于空质粒组、空白对照组,并高于同组细胞核内,差异均有统计学意义(P<0.05);空质粒组、空白对照组的细胞质内P21蛋白表达水平低于细胞核内,差异均有统计学意义(P<0.05).PEGFP-N1-p2
作者:邹国明;肖祖克
来源:海南医学 2018 年 29卷 19期