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目的:在大肠杆菌BL21 (DE3)中高效表达融合的Tat蛋白.方法:用PCR方法从HIV cDNA文库中扩增出Tat基因,并将其插入到表达载体pEGx-KG中, 转化到E.coli 中进行融合表达, 表达产物用蛋白电泳和Western-blot进行鉴定.结果:成功地构建了重组质粒pEGx-KG-Tat, 重组质粒在大肠杆菌BL21 (DE3)中得到高效表达.蛋白电泳和Western-blot分析表明, 在相对分子质量(M r )为38.9 kDa处有1条特异性的带.结论:GST基因与H IV-1 Tat基因的融合构建, 使Tat蛋白在大肠杆菌中得到高效表达,为艾滋病的防治研究奠定了基础.

作者:陈凡;周菁;章晓联;谭光宏;林映莹

来源:海南医学院学报 2008 年 14卷 2期

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作者:
陈凡;周菁;章晓联;谭光宏;林映莹
来源:
海南医学院学报 2008 年 14卷 2期
标签:
大肠杆菌 HIV-1 Tat pEGx-KG载体 基因表达
目的:在大肠杆菌BL21 (DE3)中高效表达融合的Tat蛋白.方法:用PCR方法从HIV cDNA文库中扩增出Tat基因,并将其插入到表达载体pEGx-KG中, 转化到E.coli 中进行融合表达, 表达产物用蛋白电泳和Western-blot进行鉴定.结果:成功地构建了重组质粒pEGx-KG-Tat, 重组质粒在大肠杆菌BL21 (DE3)中得到高效表达.蛋白电泳和Western-blot分析表明, 在相对分子质量(M r )为38.9 kDa处有1条特异性的带.结论:GST基因与H IV-1 Tat基因的融合构建, 使Tat蛋白在大肠杆菌中得到高效表达,为艾滋病的防治研究奠定了基础.