目的:探讨PUMA在移植胰腺缺血再灌注损伤(I/RI)中的早期促凋亡作用.方法:对封闭群大鼠建立大鼠腔静脉内分泌引流、肠道外分泌引流的动物模型.再灌注后第0、1、2、3、4、6、9、12 h等时点,每时点处死5只大鼠,切取移植胰腺,石蜡包埋切片,原位DNA缺口末端标记(TUNEL)法测定胰腺组织细胞凋亡, Western blot方法测定移植胰腺组织PUMA,bcl-2、bax、caspase-3蛋白表达.结果:再灌注术后第0、1、2、3、4、6、9、12 h,胰腺细胞凋亡数分别为(29.42±4.93)、(47.65±6.43)、(74.80±9.73)、(106.35±16.80)、(148.71±19.50)、(123.96±15.54)、(97.32±10.60)和(57.42±9.56)个/高倍视野.各时点均显著高于正常胰腺(23.48±4.26).第4小时细胞凋亡数明显增高,12 h降低到最低值,不同组细胞凋亡数的差异有统计学意义(P <0.01);PUMA以及其下游的bax和caspase-8蛋白表达在第4小时达到最高峰,12 h降低到最高值,bcl-2在第4小时达到最低值,蛋白表达差异均有统计学意义(P <0.05),以后逐渐升高,12 h降低到最低值,PUMA表达与各时点的细胞凋亡数有明显的正相关(r=1.00,P <0.05).结论:I/RI后细胞早期凋亡与PUMA活化有关,PUMA是通过调节下游bax、caspase-8、bcl-2基因发挥凋亡促进作用.
作者:吴娅娜;张克君;崔海宁;王正文;明松林
来源:海南医学院学报 2009 年 15卷 4期