目的 通过检测miR-16在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者血浆和关节滑液中的表达,探讨其在RA鉴别诊断以及病情评估中的应用价值.方法 应用茎环逆转录引物的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR法检测RA患者血浆、关节滑液以及单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中miR-16的表达水平,以U6snRNA为内参,另有10例骨关节炎(osteoarthritis,OA)作病例对照.结果 目的基因miR-16和内参U6snRNA的扩增曲线及熔解曲线均良好,未出现非特异性产物及引物二聚体现象.miR-16在血浆中表达水平显著高于关节滑液和外周血PBMC(P＜0.01);miR-16在RA患者PBMC中的表达水平显著高于正常对照组(P＜0.01).与OA患者相比,miR-16在RA患者关节滑液中的表达水平显著升高(P＜0.01).血浆中miR-16表达与疾病活动度量表(Disease Activity Score,DAS28)评分呈负相关(P＜o.05),与红细胞沉降率(erythrocytesedimentation rate,ESR)及C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)均无相关性(P＞0.05);PBMC中miR-16表达与DAS28评分、ESR及CRP均呈正相关(P＜0.05),关节滑液中miR-16表达与DAS28评分、ESR及CRP均无相关性(P＞0.05).结论 茎环逆转录引物的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR法是灵敏而且特异的miRNA检测方法.血浆和关节滑液miR-16

作者：冯忠军；冯彦蕊；闻海丰；孙寅

来源：河北医科大学学报 2016 年 37卷 3期