目的:探究miR-30a-5p通过靶向细胞增殖调控基因4(Up-regulated gene 4/Up-regula-tor of cell proliferation,URG4/URGCP)对胃癌(Gastric cancer,GC)细胞凋亡和糖酵解的影响,并阐明其潜在调控机制.方法:采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测miR-30a-5p和URGCP在正常胃黏膜上皮细胞(GES-1)和GC细胞(AGS、HGC-27和SGC-7901)中的表达.选用HGC-27细胞作为后续实验研究对象并随机分为六组,除Control组外,其他组细胞分别转染miR-NC、miR-30a-5p mimic、pcDNA-NC、pcDNA-URGCP和pcDNA-URGCP+miR-30a-5p mimic.CCK-8实验用于检测各组细胞增殖活力,流式细胞术用于检测各组细胞凋亡水平.三磷酸腺苷(Adenosine Triphosphate,ATP)和乳酸检测试剂盒检测各组细胞乳酸生成和ATP水平.此外,双荧光酶素报告实验用于验证miR-30a-5p和URGCP之间的靶向关系.结果:相比较正常胃黏膜上皮细胞GES-1,miR-30a-5p在GC细胞(AGS、HGC-27和SGC-7901)中的表达均明显降低(P<0.01),而URGCP呈现出相反的表达趋势.随后,与miR-NC组相比,miR-30a-5p mimic组GC细胞增殖能力下降(P<0.01),凋亡水平升高(P<0.01),ATP和乳酸水平降低(P<0.01).此外,miR-30a-5p能直接靶向结合URGCP,且两者表达呈负相关.最后,相比较pcD-NA-NC组,pcDNA-URGCP组GC细胞增殖能力

作者：杨勐

来源：河北医学 2022 年 28卷 6期