目的:探讨肝癌细胞系HepG2和HLE中,AFP参与RA-RAR信号通路的作用方式及其意义。方法Western blotting检测这两种细胞中AFP与RAR的含量;ATRA处理细胞后,免疫荧光法检测细胞中RAR定位;流式细胞术( FCM)检测细胞凋亡情况;采用激光共聚焦显微镜观察AFP与RAR在细胞中的定位情况;免疫共沉淀验证AFP与RAR的相互作用。结果 Western blotting结果显示HepG2细胞为AFP阳性而HLE为阴性;免疫荧光结果显示加入ATRA后,RAR发生核转位和核聚集现象;FCM结果显示ATRA能够引起这两种肝癌细胞凋亡增加;激光共聚焦显微镜结果显示AFP与RAR在胞浆中存在共定位现象;免疫共沉淀结果证实在HepG2细胞中AFP与RAR存在相互作用,而HLE因缺失AFP而检测不到。结论 AFP通过抑制RA-RAR信号通路的传递从而参与调控肝癌的发生发展。
作者:王珊珊;陈宁;庞丽君;欧阳雅博;李刚;陈德喜
来源:河北医药 2014 年 24期