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目的 探讨肝素结合细胞因子(Midkine)的表达对乳腺癌细胞的增殖和侵袭的作用.方法 采用慢病毒介导的shRNA干扰技术在乳腺癌细胞中沉默Midkine的表达,及利用慢病毒高表达Midkine基因在正常乳腺表皮细胞中.利用蛋白质印迹(Western blot)法检测shRNA干扰或高表达后的正常乳腺表皮细胞和乳腺癌细胞中Mid-kine蛋白的表达情况.利用流式细胞仪技术、Transwell小室实验、及细胞划痕实验,分析Midkine基因高低表达对正常乳腺表皮细胞和乳腺癌细胞生长、增殖、侵袭及转移的影响.结果 首先观察了不同乳腺癌细胞中Midkine的表达情况.其中Midkine只有在BT549、MDA-MB157和MDA-MB436间充质乳腺癌细胞(Mesenchymal cell)中表达,而正常细胞和上皮细胞乳腺癌细胞(Epithelial cell)中不表达.BT549细胞中两种不同shRNA降低Mdikine蛋白表达的效率分别达到100

作者:于晓旻;朴海龙;孙艳;李金英;钟敏

来源:河北医药 2017 年 39卷 1期

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作者:
于晓旻;朴海龙;孙艳;李金英;钟敏
来源:
河北医药 2017 年 39卷 1期
标签:
乳腺肿瘤 肝素结合细胞因子 乳腺癌细胞 上皮细胞间质化 shRNA干扰 细胞迁移 细胞侵袭 breast cancer Midkine breast cancer cells epithelia mesenchymal transition shRNA interference cell migration cell invasion
目的 探讨肝素结合细胞因子(Midkine)的表达对乳腺癌细胞的增殖和侵袭的作用.方法 采用慢病毒介导的shRNA干扰技术在乳腺癌细胞中沉默Midkine的表达,及利用慢病毒高表达Midkine基因在正常乳腺表皮细胞中.利用蛋白质印迹(Western blot)法检测shRNA干扰或高表达后的正常乳腺表皮细胞和乳腺癌细胞中Mid-kine蛋白的表达情况.利用流式细胞仪技术、Transwell小室实验、及细胞划痕实验,分析Midkine基因高低表达对正常乳腺表皮细胞和乳腺癌细胞生长、增殖、侵袭及转移的影响.结果 首先观察了不同乳腺癌细胞中Midkine的表达情况.其中Midkine只有在BT549、MDA-MB157和MDA-MB436间充质乳腺癌细胞(Mesenchymal cell)中表达,而正常细胞和上皮细胞乳腺癌细胞(Epithelial cell)中不表达.BT549细胞中两种不同shRNA降低Mdikine蛋白表达的效率分别达到100