目的 探讨miR-124修饰的大鼠牙髓干细胞(rDPSCs)来源外泌体对巨噬细胞极化的影响.方法 从SD大鼠牙髓中分离出rDPSCs,流式细胞术鉴定rDPSCs表面标志物CD14、CD34、CD45、CD90、CD105、CD146的阳性比率;油红O染色、茜素红S染色观察rDPSCs成脂成骨能力.利用细胞转染技术将miR-124模拟物(miR-124 mimics)及其阴性对照(miR-NC)转染于rDPSCs,分组为空白组、miR-NC组、miR-124组,并提取转染后rDPSCs的外泌体,分别命名为Exosome组(Exo组)、Exo/miR-NC组、Exo/miR-124组,透射电镜观察外泌体形态;Western blot检测外泌体标志蛋白CD63和CD81表达水平;qRT-PCR检测rDPSCs及rDPSCs外泌体中miR-124表达水平.将25只大鼠随机分为sham组、model组、rDPSCs Exo组、rDPSCs Exo/miR-NC组和rDPSCs Exo/miR-124组,每组5只,构建皮肤缺损模型,分别于皮肤缺损相应区域注射30μl对应的外泌体进行干预,qRT-PCR检测大鼠创伤组织中miR-124表达水平;ELISA法检测大鼠血清中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、甘露糖受体(CD206)含量;Western blot检测大鼠创伤组织中肿瘤坏死因子(TNF)-α、TNF-1β、白细胞介素(IL)-6、IL-4、IL-10、IL-13蛋白表达.结果 rDPSCs表面标志物CD14、CD34、CD45的阳性比率均低于CD90、CD105、CD146;rDPSCs具有成骨成脂能
作者:刘兰宁;唐焕珍;李晓媛
来源:河北医药 2022 年 44卷 12期