目的研究谷胱甘肽(glutathione,GSH)对乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性影响的动力学机制并求取抑制常数.方法采用分光光度法追踪酶反应,用Lineweaver-Burk作图法分析动力学机制并用计算法求取抑制常数.结果在pH7.0、25℃、101.3kPa 条件下,在由乳酸转变为丙酮酸的酶反应方向,加入不同浓度的GSH对LDH1及LDH5均具有可逆抑制作用,并存在量效关系.随GSH浓度增加,表观KmNAD+及表观VmaxNAD+逐渐减小,而表观KmNAD+/VmaxNAD+不变;表观KmLac逐渐增大,表观VmaxLac不变,而表观KmLac/VmaxLac增大.结论GSH相对于NAD+为LDH1及LDH5的反竞争抑制剂,相对于乳酸为LDH1及LDH5的竞争性抑制剂;GSH结合于E-NAD+二元复合物从而降低了酶活性.抑制常数为:KLDH1-NAD+-GSH=0.397 mol/L和KLDH5-NAD+-GSH=0.033mol/L.
作者：刘岩；范业鹏
来源：哈尔滨医科大学学报 2005 年 39卷 2期
