高滴度腺病毒介导的绿色荧光蛋白和反义血管内皮生长因子165 cDNA的制备-临床诊疗知识库

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作者：

崔正军；岑瑛；张洁

来源：

郑州大学学报（医学版） 2006 年 41卷 1期

标签：

血管内皮生长因子基因治疗腺病毒载体滴度

目的:制备高滴度腺病毒介导的绿色荧光蛋白(Ad-GFP)和腺病毒介导的反义血管内皮生长因子165(Ad-aVEGF165)cDNA.方法:人胚肾293腺病毒包装细胞转染第3代Ad-GFP和Ad-aVEGF165 cDNA后,反复冻融293细胞,提取腺病毒悬液,用氯化铯梯度离心法纯化腺病毒,在荧光显微镜下测定Ad-GFP的滴度,用空斑法测定Ad-aVEGF165cDNA的滴度.结果:获取了实验所需的第4代腺病毒液,Ad-GFP的滴度为9.5×109efu/ml,AdaVEGF165 cDNA的滴度为1.2×1010pfu/m1.结论:成功制备了高滴度的Ad-GFP和Ad-aVEGF165cDNA.

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