目的:利用抗体亲和层析法从食管癌细胞内提纯热休克蛋白70肽复合物(heat shock protein70 peptidecomplexes,HSP70-PCs),观察其诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对食管癌细胞的杀伤作用.方法:常规方法造成EC-109细胞热休克,偶联HSP70抗体的CNBr-Sepharose 4B亲和层析柱分离纯化蛋白,SDS-PAGE凝胶电泳、Western blot检测获得的蛋白;混合淋巴细胞反应检测纯化过程中收集的蛋白粗提液、PBS洗脱蛋白及解吸附剂洗脱蛋白对食管癌细胞的杀伤活性.结果:细胞经热休克作用,裂解后获蛋白粗提液,经亲和层析柱过柱、洗脱后得到的蛋白经电泳鉴定为相对分子质量在70 000左右的单一条带,且经Western blot鉴定可与HSP70单克隆抗体结合,证实为HSP70;MTT法检测解吸附剂洗脱蛋白诱导的CTL对食管癌细胞的杀伤率为(38.10±2.78)
作者：周娟；李永欣；孙战强；李静静；刘光辉；祁元明
来源：郑州大学学报（医学版） 2006 年 41卷 3期
