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目的:观察硫化氢(H2S)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人近端肾小管上皮细胞转分化的影响,并初步探讨其作用的可能机制.方法:以体外培养的HK-2细胞为研究对象,分别用10 μg/L TGF-β1、100 μmol/L NaHS(H2S的供体)及2者联合作用进行干预,以正常培养的细胞作正常对照.孵育0、15、30及60 min后,Western blot检测4组细胞磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)和Smad2蛋白的表达;孵育48 h后,观察细胞形态变化,Western blot检测4组细胞E-cadherin、α-SMA蛋白的表达.结果:与正常对照组比较,TGF-β1组细胞发生梭形变,E-cadherin蛋白表达下降(F=1 262.535,P<0.001,α-SMA蛋白表达上调(F=1456.030,P<0.001);NaHS+TGF-β1组细胞发生梭形变的程度较TGF-β1组明显减轻,E-cadherin蛋白表达增加(F=65.330,P<0.001,α-SMA蛋白表达下降(F=288.300,P<0.001).TGF-β1组细胞在15、30及60 min时p-Smad2/3表达均较正常对照组增加,而NaHS+TGF-β1组细胞p-Smad2/3的表达较TGF-β1组降低(P<0.05).结论:H2S可抑制TGF-β1诱导的HK-2细胞转分化,该作用可能部分通过影响Smad2/3磷酸化程度来完成.

作者:曹慧霞;牛福坤;尤冠巧;阎磊;朱清;邵凤民

来源:郑州大学学报(医学版) 2012 年 47卷 5期

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作者:
曹慧霞;牛福坤;尤冠巧;阎磊;朱清;邵凤民
来源:
郑州大学学报(医学版) 2012 年 47卷 5期
标签:
硫化氢 肾小管上皮细胞 TGF-β1 上皮间充质转化 HK-2细胞
目的:观察硫化氢(H2S)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人近端肾小管上皮细胞转分化的影响,并初步探讨其作用的可能机制.方法:以体外培养的HK-2细胞为研究对象,分别用10 μg/L TGF-β1、100 μmol/L NaHS(H2S的供体)及2者联合作用进行干预,以正常培养的细胞作正常对照.孵育0、15、30及60 min后,Western blot检测4组细胞磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)和Smad2蛋白的表达;孵育48 h后,观察细胞形态变化,Western blot检测4组细胞E-cadherin、α-SMA蛋白的表达.结果:与正常对照组比较,TGF-β1组细胞发生梭形变,E-cadherin蛋白表达下降(F=1 262.535,P<0.001,α-SMA蛋白表达上调(F=1456.030,P<0.001);NaHS+TGF-β1组细胞发生梭形变的程度较TGF-β1组明显减轻,E-cadherin蛋白表达增加(F=65.330,P<0.001,α-SMA蛋白表达下降(F=288.300,P<0.001).TGF-β1组细胞在15、30及60 min时p-Smad2/3表达均较正常对照组增加,而NaHS+TGF-β1组细胞p-Smad2/3的表达较TGF-β1组降低(P<0.05).结论:H2S可抑制TGF-β1诱导的HK-2细胞转分化,该作用可能部分通过影响Smad2/3磷酸化程度来完成.