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目的:探讨有丝分裂相关激酶Plk1磷酸化修饰Tara蛋白在调控HeLa细胞胞质分裂及增殖中的作用。方法:运用酵母双杂交、免疫共沉淀、体外沉降实验确定Plk1与Tara两种蛋白是否能够相互结合;采用体内外磷酸化实验明确Plk1对Tara蛋白的磷酸化修饰;采用免疫荧光实验及流式细胞术检测Tara蛋白的磷酸化对HeLa细胞胞质分裂及细胞增殖的影响。结果:Plk1与Tara在体内外均能结合;Tara蛋白在体内外均能够被Plk1磷酸化修饰;过量表达Tara蛋白的磷酸化突变体对HeLa细胞的胞质分裂有明显的抑制作用,细胞增殖明显受阻。结论:Plk1能够与Tara结合,并通过磷酸化修饰Tara蛋白阻碍细胞胞质分裂进程及抑制细胞增殖。

作者:王冲;王伟琼;余建;刘延方;孙玲;孙慧;黄河

来源:郑州大学学报(医学版) 2013 年 6期

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王冲;王伟琼;余建;刘延方;孙玲;孙慧;黄河
来源:
郑州大学学报(医学版) 2013 年 6期
标签:
Plk1 Tara 磷酸化 胞质分裂 细胞增殖 HeLa细胞 Plk1 Tara phosphorylation cytokinesis proliferation HeLa cell
目的:探讨有丝分裂相关激酶Plk1磷酸化修饰Tara蛋白在调控HeLa细胞胞质分裂及增殖中的作用。方法:运用酵母双杂交、免疫共沉淀、体外沉降实验确定Plk1与Tara两种蛋白是否能够相互结合;采用体内外磷酸化实验明确Plk1对Tara蛋白的磷酸化修饰;采用免疫荧光实验及流式细胞术检测Tara蛋白的磷酸化对HeLa细胞胞质分裂及细胞增殖的影响。结果:Plk1与Tara在体内外均能结合;Tara蛋白在体内外均能够被Plk1磷酸化修饰;过量表达Tara蛋白的磷酸化突变体对HeLa细胞的胞质分裂有明显的抑制作用,细胞增殖明显受阻。结论:Plk1能够与Tara结合,并通过磷酸化修饰Tara蛋白阻碍细胞胞质分裂进程及抑制细胞增殖。