目的:探讨沙门菌质粒毒力基因(spv)表达改变对鼠伤寒沙门菌耐药表型的影响.方法:在eGFP基因序列上下游增加启动子及终止子并在两端位点上、下游设计酶切位点,以pACYC184-eGFP为载体,构建spv基因回补质粒,电转化至前期构建的鼠伤寒沙门菌spvB及spvC基因共同缺陷株获得基因回补株,检测菌株间耐药性的差异及acrAB表达的差异.结果:成功构建鼠伤寒沙门菌spvB、spvC基因荧光回补株,连续培养12代质粒未发生丢失.与野生型菌株及回补株相比,spv基因缺陷变异株对哌拉西林他唑巴坦、头孢噻肟、头孢西丁、四环素、氯霉素及环丙沙星的MIC值下降.spv基因缺陷变异株AcrA周质蛋白水平低于野生菌株及回补株(P<0.05).结论:在spvB及spvC基因共同缺陷鼠伤寒沙门菌基础上的基因回补株构建成功,spv下调能改变鼠伤寒沙门菌的耐药表型,这可能是通过影响外排泵AcrA来完成的.
作者：朱春晖；王文杏；陈强；陈庆法；吴春雪；刘晓艳；赖华毅；余晓君
来源：郑州大学学报（医学版） 2018 年 53卷 2期
