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目的:观察铁皮石斛多糖(DP)对心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用并探讨其作用机制.方法:建立H9c2大鼠心肌细胞缺氧/复氧模型,将H9c2细胞分为正常对照(Con)组,缺氧/复氧(H/R)组(缺氧3 h,复氧3 h),缺氧/复氧+铁皮石斛多糖低(H/R+LDP 0.1μg/L)、中(H/R+MDP 0.2μg/L)、高(H/R+HDP 0.4μg/L)质量浓度组(DP预处理30 min后行H/R处理).MTT法检测各组H9c2细胞存活率,比色法检测细胞内ROS水平、MDA含量和上清液中LDH含量,AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,Western blot法检测NF-κB p65和TLR-4蛋白表达水平.结果:与Con组比较,H/R组H9c2细胞存活率降低,细胞中ROS水平及MDA含量升高,上清液中LDH含量增加,细胞凋亡率升高,细胞中NF-κB p65和TLR-4蛋白的表达水平上调(P<0.05);与H/R组比较,铁皮石斛多糖预处理后,H9c2细胞存活率升高,细胞中ROS水平及MDA含量减少,上清液中LDH含量减少,细胞凋亡率降低,细胞中NF-κB p65和TLR-4蛋白的表达水平下调(P<0.05).结论:铁皮石斛多糖对H9c2细胞缺氧/复氧损伤具有一定的保护作用,其作用机制可能与提高细胞活性、增强抗氧化损伤能力、抑制细胞凋亡、抑制NF-κB/TLR-4信号通路有关.

作者:徐姗;胡楠

来源:郑州大学学报(医学版) 2019 年 54卷 5期

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作者:
徐姗;胡楠
来源:
郑州大学学报(医学版) 2019 年 54卷 5期
标签:
铁皮石斛多糖 心肌细胞 缺氧/复氧 NF-κB/TLR-4信号通路 心肌缺血再灌注
目的:观察铁皮石斛多糖(DP)对心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用并探讨其作用机制.方法:建立H9c2大鼠心肌细胞缺氧/复氧模型,将H9c2细胞分为正常对照(Con)组,缺氧/复氧(H/R)组(缺氧3 h,复氧3 h),缺氧/复氧+铁皮石斛多糖低(H/R+LDP 0.1μg/L)、中(H/R+MDP 0.2μg/L)、高(H/R+HDP 0.4μg/L)质量浓度组(DP预处理30 min后行H/R处理).MTT法检测各组H9c2细胞存活率,比色法检测细胞内ROS水平、MDA含量和上清液中LDH含量,AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,Western blot法检测NF-κB p65和TLR-4蛋白表达水平.结果:与Con组比较,H/R组H9c2细胞存活率降低,细胞中ROS水平及MDA含量升高,上清液中LDH含量增加,细胞凋亡率升高,细胞中NF-κB p65和TLR-4蛋白的表达水平上调(P<0.05);与H/R组比较,铁皮石斛多糖预处理后,H9c2细胞存活率升高,细胞中ROS水平及MDA含量减少,上清液中LDH含量减少,细胞凋亡率降低,细胞中NF-κB p65和TLR-4蛋白的表达水平下调(P<0.05).结论:铁皮石斛多糖对H9c2细胞缺氧/复氧损伤具有一定的保护作用,其作用机制可能与提高细胞活性、增强抗氧化损伤能力、抑制细胞凋亡、抑制NF-κB/TLR-4信号通路有关.