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目的:探讨沉默生长分化因子15(GDF15)对高糖诱导的人肾小管上皮细胞HK-2凋亡和氧化应激的影响及作用机制.方法:采用Western blot法检测16例糖尿病肾病(DN)患者和正常肾组织中GDF15蛋白表达水平.转染GDF15小干扰RNA(si-GDF15)、无义阴性序列(si-NC)至HK-2细胞,Western blot法检测细胞中GDF15蛋白水平(验证转染效果).HK-2细胞分为对照组、高糖组、si-GDF15+高糖组、si-NC+高糖组,流式细胞仪检测各组细胞凋亡,2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)法检测各组细胞中活性氧簇(ROS)含量,酶联免疫吸附法检测各组细胞中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,Western blot法检测各组细胞中Bcl-2、Bax、细胞核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达水平.结果:与正常肾组织比较,DN患者肾组织中GDF15蛋白表达水平升高(P<0.001).与对照组比较,高糖组HK-2细胞凋亡率、细胞中Bax、HO-1和细胞核Nrf2蛋白、MDA以及ROS水平升高(P<0.001),细胞中Bcl-2和细胞质Nrf2蛋白水平、SOD和GSH-Px水平降低(P<0.001).与si-NC+高糖组比较,si-GDF15+高糖组HK-2细胞凋亡率、细胞中Bax和细胞质Nrf2蛋白、MDA及ROS水平降低(P<0.001),细胞中Bcl-2、HO-1和细胞核Nrf2蛋白水平、SOD和GSH-Px水平

作者:郭海燕;邢志华;王丽丽;解菊芬

来源:郑州大学学报(医学版) 2020 年 55卷 3期

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作者:
郭海燕;邢志华;王丽丽;解菊芬
来源:
郑州大学学报(医学版) 2020 年 55卷 3期
标签:
肾小管上皮细胞 生长分化因子15 细胞凋亡 氧化应激 Nrf2/HO-1信号通路
目的:探讨沉默生长分化因子15(GDF15)对高糖诱导的人肾小管上皮细胞HK-2凋亡和氧化应激的影响及作用机制.方法:采用Western blot法检测16例糖尿病肾病(DN)患者和正常肾组织中GDF15蛋白表达水平.转染GDF15小干扰RNA(si-GDF15)、无义阴性序列(si-NC)至HK-2细胞,Western blot法检测细胞中GDF15蛋白水平(验证转染效果).HK-2细胞分为对照组、高糖组、si-GDF15+高糖组、si-NC+高糖组,流式细胞仪检测各组细胞凋亡,2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)法检测各组细胞中活性氧簇(ROS)含量,酶联免疫吸附法检测各组细胞中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,Western blot法检测各组细胞中Bcl-2、Bax、细胞核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达水平.结果:与正常肾组织比较,DN患者肾组织中GDF15蛋白表达水平升高(P<0.001).与对照组比较,高糖组HK-2细胞凋亡率、细胞中Bax、HO-1和细胞核Nrf2蛋白、MDA以及ROS水平升高(P<0.001),细胞中Bcl-2和细胞质Nrf2蛋白水平、SOD和GSH-Px水平降低(P<0.001).与si-NC+高糖组比较,si-GDF15+高糖组HK-2细胞凋亡率、细胞中Bax和细胞质Nrf2蛋白、MDA及ROS水平降低(P<0.001),细胞中Bcl-2、HO-1和细胞核Nrf2蛋白水平、SOD和GSH-Px水平