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目的:基于Toll-MyD88信号通路观察桂枝芍药知母汤对尿酸钠诱导的大鼠巨噬细胞炎性信号表达的影响,以期分析其抗炎的药效作用机制.方法:以尿酸钠混悬液诱导大鼠巨噬细胞制备痛风性关节炎巨噬细胞模型,以桂枝芍药知母汤含药血清进行干预,ELISA法检测白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、钙结合蛋白S100A8的表达,DNA-蛋白质互作ELISA (DPI-ELISA)方法检测核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)活性;Western-Blot法检测髓性分化因子-88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)信号衔接蛋白、核因子κB酶抑制剂-β(inhibitor kappa B kinase β,IKK-β)、核因子κB抑制蛋白α亚基(NF-kappa-B inhibitor alpha,IKB-α)表达水平;逆转录PCR检测Toll样受体-2(toll-like receptor-2,TLR-2)、TLR-4mRNA的表达.结果:尿酸钠混悬液诱导巨噬细胞造模2h后,模型细胞对照组IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、S100A8含量,NF-κB活性,MyD88、IKK-β蛋白表达及TLR-2、TLR-4 mRNA表达较正常细胞对照组显著增高(P<0.05),IKB-α表达较正常细胞对照组显著降低(P<0.05);与模型细胞对照组比较,桂枝芍药知母汤各剂量组细胞表达TLR-2、TLR-4 mRNA水平显著降低(P<0.05)

作者:王永辉;房树标;李艳彦;周然

来源:中医学报 2017 年 32卷 5期

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王永辉;房树标;李艳彦;周然
来源:
中医学报 2017 年 32卷 5期
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桂枝芍药知母汤 巨噬细胞 To11-MyD88 尿酸钠 白细胞介素-1β,白细胞介素-6 肿瘤坏死因子-α 钙结合蛋白S100A8 髓性分化因子-88 核因子κB酶抑制剂-β 核因子κB抑制蛋白α亚基 Toll样受体-2 大鼠 Guizhi Shaoyao Zhimu Decoction macrophage Toll-MyD88 sodium urate interleukin-1β,interleukin-6 tumor necrosis factor-α calcium binding protein S100A8 myeloid differentiation factor-88 Factor kappaB inhibitor-beta nuclear factor kappa B inhibitor protein
目的:基于Toll-MyD88信号通路观察桂枝芍药知母汤对尿酸钠诱导的大鼠巨噬细胞炎性信号表达的影响,以期分析其抗炎的药效作用机制.方法:以尿酸钠混悬液诱导大鼠巨噬细胞制备痛风性关节炎巨噬细胞模型,以桂枝芍药知母汤含药血清进行干预,ELISA法检测白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、钙结合蛋白S100A8的表达,DNA-蛋白质互作ELISA (DPI-ELISA)方法检测核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)活性;Western-Blot法检测髓性分化因子-88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)信号衔接蛋白、核因子κB酶抑制剂-β(inhibitor kappa B kinase β,IKK-β)、核因子κB抑制蛋白α亚基(NF-kappa-B inhibitor alpha,IKB-α)表达水平;逆转录PCR检测Toll样受体-2(toll-like receptor-2,TLR-2)、TLR-4mRNA的表达.结果:尿酸钠混悬液诱导巨噬细胞造模2h后,模型细胞对照组IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、S100A8含量,NF-κB活性,MyD88、IKK-β蛋白表达及TLR-2、TLR-4 mRNA表达较正常细胞对照组显著增高(P<0.05),IKB-α表达较正常细胞对照组显著降低(P<0.05);与模型细胞对照组比较,桂枝芍药知母汤各剂量组细胞表达TLR-2、TLR-4 mRNA水平显著降低(P<0.05)