目的:探讨miR-223对高糖诱导的肾小管上皮(renal tubule epithelia,NRK-52E)细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响及其机制.方法:将体外培养的NRK62E细胞分为对照组(5 mmol·L-1 D-葡萄糖)、高糖组(30 mmol·L-1 D-葡萄糖)、高糖+模拟物对照组(转染miR-223模拟物对照后,30 mmol·L-1 D-葡萄糖处理)和高糖+模拟物组(转染miR-223模拟物后,30 mmol·L-1 D-葡萄糖处理),采用RT-PCR检测各组细胞中miR-223、NLRP3、IL-1β和IL-18 mRNA的表达,Western blot检测NLRP3蛋白和EMT相关蛋白α-SMA、E-cadherin的表达,双荧光素酶报告基因实验检测miR-223和NLRP3的靶向关系.另外,构建NLRP3过表达的NRK-52E细胞株,观察NLRP3过表达对miR-223过表达的NRK-52E细胞EMT进展的影响.结果:与对照组比较,高糖刺激后可引起miR-223和E-cadherin蛋白的表达降低,而NLRP3、IL-1β和IL-18 mRNA以及NLRP3、α-SMA蛋白表达升高(P＜0.05).与高糖组比较,转染miR-223模拟物后高糖环境下NRK62E细胞中miR-223和E-cadherin蛋白的表达水平显著升高,NLRP3、IL-1β和IL-18 mR-NA以及NLRP3、α-SMA蛋白的表达水平显著降低(P＜0.05);但转染miR-223模拟物阴性对照后对高糖环境下的NRK-52E细胞无显著影响(P＞0.05).双荧光素酶

作者：付婷婷；赵璐

来源：中医学报 2020 年 35卷 1期